Anar al contingut

Ferramentes de disseny de CRISPR-Cas

De L'Enciclopèdia, la wikipedia en valencià

Les ferramentes de disseny de CRISPR-Cas són plataformes de software informàtic i ferramentes bioinformáticas que s'utilisen per a facilitar el disseny d'ARN guia (ARNg) per al seu us en el sistema d'edició de gens CRISPR / Cas.

CRISPR-Cas

[editar | editar còdic]

El sistema CRISPR / Cas (repeticions palindrómicas curtes agrupades regularment interespaciadas / nucleasas associades a CRISPR) es va descobrir originalment com un mecanisme de resposta immune adquirida utilisat per archaea i bactèries. Des de llavors ha segut adoptat per a us com a ferramenta en l'ingenieria genètica d'organismes més alts.

El disseny d'un ARNg apropiat és un element important de l'edició de genoma en el sistema CRISPR / Cas. Un ARNg pot tindre interaccions no desijades ("fòra dels objectius") en atres ubicacions en el genoma d'interés, i a voltes les té. Per a un ARNg candidat donat, estes ferramentes produïxen la seua llista de possibles objectius no desijats en el genoma, lo que permet al dissenyador evaluar la seua idoneïtat abans d'embarcar-se en experiments.

Els científics també han començat a explorar la mecànica del sistema CRISPR / Cas i cuales factors determinen qué tan bo o actiu és un ARNg per a dirigir la nucleasa Cas a una ubicació específica del genoma d'interés.[1][2] Com a resultat d'este treball, s'han publicat nous métodos per a evaluar un gRNA per la seua 'activitat', i ara és una bona pràctica considerar tant les interaccions no desijades d'un gRNA com l'activitat prevista d'un gRNA en l'etapa de disseny.

La següent taula enumera les ferramentes disponibles i els seus atributs.

Llista de ferramentes de disseny CRISPR-Cas
Nom de la ferramenta Proveïdor Busca objectius en tot el genoma Torna tots els objectius del genoma Es pot definir l'extensió i l'ubicació de la llavor Número màxim de desajusts admesos Prediu l'activitat de gRNA Seqüències de motiu adjacent Protospacer (PAM) disponibles anotació és sugerida sugerència de ARNg o puntuació Referències
Invitrogen TrueDesign Genome Editor Thermo Fisher Scientific No 3 No NGG [3]
Breaking-Cas Spanish National Center for Biotechnology Sí (over 1000 genomes) Sí (by weights) 4 No User customizable [4]
Cas-OFFinder Seoul National University No 0-10 No NGG, NRG, NNAGAAW, NNNNGMTT No [5]
CASTING Caagle No 3 No NGG and NAG No [6]
CRISPy Technical University of Denmark No All No NGG [7]
CCTop University of Heidelberg Partial 5 (0-5) NGG, NRG, NNGRRT, NNNNGATT, NNAGAAW, NAAAAC [8]
CHOPCHOP Harvard University Partial 0, 2 No NGG, NNAGAA, NNNNGANN No [9]
CHOPCHOP v2 University of Bergen 3 (0-3) User customizable [10]
CRISPOR University of Califòrnia, Santa Creu TEFOR Sí (over 200 genomes) No 4 NGG, NGA, NGCG, NNAGAA, NGGNG, NNGRRT, NNNRRT, NNNNGMTT, NNNNACA, TTTN [11]
CRISPR Design Zhang Lab, MIT No No 4 No NGG and NAG mRNA exons [12]
CRISPRdirect Database Center for Life Science (DBCLS) Sí (over 200 species) No Any number No NNN [13]
CRISPRscan Giraldez Lab, Yale No 4 NGG, TTTV, TTTN [14]
CRISPRseek Bioconductor No Any number No User customizable mRNA exons [15]
DESKGEN Desktop Genetics Any number Fully user customizable [16]
GuideScan GuideScan 3 on website and customizable with command line NGG/NAG on website and customizable with command line [17]
GT-Scan CSIRO 3 (0-3) No User customizable Links to Ensembl genome browser [18]
Off-Spotter Thomas Jefferson University 0-5 NGG, NAG, NNNNACA, NNGRRT (R is A or G) mRNA exons, unspliced mRNA, mRNA, 5'UTR, CDS, 3'UTR, unspliced lincRNA, lincRNA User customizable [19]
sgRNA Designer Broad Institute No No No 0 NGG CDS (if searching by transcript ID) [1]
Synthego Design Tool Synthego Sí (over 120,000 genomes) No (Optimized for Knockout) 3 NGG Sí (RefSeq, Ensembl, Gencode)
TUSCAN CSIRO No No No 0 NGG No [20]
VARSCOT CSIRO No 0-8 User customizable No [21]
CRISPR Targeted Gene Designer Horizon Discovery Sí, múltiple 4 NGG, NNGRRT, YTTV, other (21)


Referències

[editar | editar còdic]
  1. 1,0 1,1 Nature Biotechnology.32(12)
    1262–7.doi:10.1038/nbt.3026.
  2. Nature Methods.12(9)
    823–6.doi:10.1038/nmeth.3473.
  3. Journal of Biotechnology.241
    136–146.ISSN 0168-1656.doi:10.1016/j.jbiotec.2016.11.011.
  4. Nucleic Acids Research.44(W1)
    W267-71.doi:10.1093/nar/gkw407.
  5. Bioinformatics.30(10)
    1473–5.doi:10.1093/bioinformatics/btu048.
  6. Scientific Reports.6
    35766.doi:10.1038/srep35766.
  7. Biotechnology and Bioengineering.111(8)
    1604–1616.doi:10.1002/bit.25233.
  8. (2015).PLOS ONE.10(4)
    i0124633.doi:10.1371/journal.posa.0124633.
  9. Nucleic Acids Research.42(Web Server issue)
    W401-7.doi:10.1093/nar/gku410.
  10. Nucleic Acids Research.44(W1)
    W272–6.doi:10.1093/nar/gkw398.
  11. Genome Biology.17(1)
    148.doi:10.1186/s13059-016-1012-2.
  12. Nature Biotechnology.31(9)
    827–32.doi:10.1038/nbt.2647.
  13. Bioinformatics.31(7)
    1120–3.doi:10.1093/bioinformatics/btu743.
  14. Nature Methods.12(10)
    982–8.doi:10.1038/nmeth.3543.
  15. (2014).PLOS ONE.9(9)
    i108424.doi:10.1371/journal.posa.0108424.
  16. «[1]».
  17. Nature Biotechnology.35(4)
    347–349.doi:10.1038/nbt.3804.
  18. Bioinformatics.30(18)
    2673–5.doi:10.1093/bioinformatics/btu354.
  19. Biology Direct.10(1)
    4.doi:10.1186/s13062-015-0035-z.
  20. The CRISPR Journal.1(2)
    182–190.doi:10.1089/crispr.2017.0021.
  21. BMC Biotechnology.19(1)
    40.doi:10.1186/s12896-019-0535-5.