Ferramentes de disseny de CRISPR-Cas
Les ferramentes de disseny de CRISPR-Cas són plataformes de software informàtic i ferramentes bioinformáticas que s'utilisen per a facilitar el disseny d'ARN guia (ARNg) per al seu us en el sistema d'edició de gens CRISPR / Cas.
CRISPR-Cas
[editar | editar còdic]El sistema CRISPR / Cas (repeticions palindrómicas curtes agrupades regularment interespaciadas / nucleasas associades a CRISPR) es va descobrir originalment com un mecanisme de resposta immune adquirida utilisat per archaea i bactèries. Des de llavors ha segut adoptat per a us com a ferramenta en l'ingenieria genètica d'organismes més alts.
El disseny d'un ARNg apropiat és un element important de l'edició de genoma en el sistema CRISPR / Cas. Un ARNg pot tindre interaccions no desijades ("fòra dels objectius") en atres ubicacions en el genoma d'interés, i a voltes les té. Per a un ARNg candidat donat, estes ferramentes produïxen la seua llista de possibles objectius no desijats en el genoma, lo que permet al dissenyador evaluar la seua idoneïtat abans d'embarcar-se en experiments.
Els científics també han començat a explorar la mecànica del sistema CRISPR / Cas i cuales factors determinen qué tan bo o actiu és un ARNg per a dirigir la nucleasa Cas a una ubicació específica del genoma d'interés.[1][2] Com a resultat d'este treball, s'han publicat nous métodos per a evaluar un gRNA per la seua 'activitat', i ara és una bona pràctica considerar tant les interaccions no desijades d'un gRNA com l'activitat prevista d'un gRNA en l'etapa de disseny.
Taula
[editar | editar còdic]La següent taula enumera les ferramentes disponibles i els seus atributs.
| Nom de la ferramenta | Proveïdor | Busca objectius en tot el genoma | Torna tots els objectius del genoma | Es pot definir l'extensió i l'ubicació de la llavor | Número màxim de desajusts admesos | Prediu l'activitat de gRNA | Seqüències de motiu adjacent Protospacer (PAM) disponibles | anotació és sugerida | sugerència de ARNg o puntuació | Referències |
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| Invitrogen TrueDesign Genome Editor | Thermo Fisher Scientific | Sí | Sí | No | 3 | No | NGG | Sí | Sí | [3] |
| Breaking-Cas | Spanish National Center for Biotechnology | Sí (over 1000 genomes) | Sí | Sí (by weights) | 4 | No | User customizable | Sí | Sí | [4] |
| Cas-OFFinder | Seoul National University | Sí | Sí | No | 0-10 | No | NGG, NRG, NNAGAAW, NNNNGMTT | No | Sí | [5] |
| CASTING | Caagle | Sí | Sí | No | 3 | No | NGG and NAG | No | Sí | [6] |
| CRISPy | Technical University of Denmark | Sí | Sí | No | All | No | NGG | Sí | Sí | [7] |
| CCTop | University of Heidelberg | Sí | Sí | Partial | 5 (0-5) | Sí | NGG, NRG, NNGRRT, NNNNGATT, NNAGAAW, NAAAAC | Sí | Sí | [8] |
| CHOPCHOP | Harvard University | Sí | Sí | Partial | 0, 2 | No | NGG, NNAGAA, NNNNGANN | No | Sí | [9] |
| CHOPCHOP v2 | University of Bergen | Sí | Sí | Sí | 3 (0-3) | Sí | User customizable | Sí | Sí | [10] |
| CRISPOR | University of Califòrnia, Santa Creu TEFOR | Sí (over 200 genomes) | Sí | No | 4 | Sí | NGG, NGA, NGCG, NNAGAA, NGGNG, NNGRRT, NNNRRT, NNNNGMTT, NNNNACA, TTTN | Sí | Sí | [11] |
| CRISPR Design | Zhang Lab, MIT | Sí | No | No | 4 | No | NGG and NAG | mRNA exons | Sí | [12] |
| CRISPRdirect | Database Center for Life Science (DBCLS) | Sí (over 200 species) | Sí | No | Any number | No | NNN | Sí | Sí | [13] |
| CRISPRscan | Giraldez Lab, Yale | Sí | Sí | No | 4 | Sí | NGG, TTTV, TTTN | Sí | Sí | [14] |
| CRISPRseek | Bioconductor | Sí | Sí | No | Any number | No | User customizable | mRNA exons | Sí | [15] |
| DESKGEN | Desktop Genetics | Sí | Sí | Sí | Any number | Sí | Fully user customizable | Sí | Sí | [16] |
| GuideScan | GuideScan | Sí | Sí | Sí | 3 on website and customizable with command line | Sí | NGG/NAG on website and customizable with command line | Sí | Sí | [17] |
| GT-Scan | CSIRO | Sí | Sí | Sí | 3 (0-3) | No | User customizable | Links to Ensembl genome browser | Sí | [18] |
| Off-Spotter | Thomas Jefferson University | Sí | Sí | Sí | 0-5 | NGG, NAG, NNNNACA, NNGRRT (R is A or G) | mRNA exons, unspliced mRNA, mRNA, 5'UTR, CDS, 3'UTR, unspliced lincRNA, lincRNA | User customizable | [19] | |
| sgRNA Designer | Broad Institute | No | No | No | 0 | Sí | NGG | CDS (if searching by transcript ID) | Sí | [1] |
| Synthego Design Tool | Synthego | Sí (over 120,000 genomes) | No (Optimized for Knockout) | Sí | 3 | Sí | NGG | Sí (RefSeq, Ensembl, Gencode) | Sí | |
| TUSCAN | CSIRO | No | No | No | 0 | Sí | NGG | No | Sí | [20] |
| VARSCOT | CSIRO | Sí | Sí | No | 0-8 | Sí | User customizable | No | Sí | [21] |
| CRISPR Targeted Gene Designer | Horizon Discovery | Sí, múltiple | Sí | Sí | 4 | Sí | NGG, NNGRRT, YTTV, other | Sí | Sí | (21) |
Referències
[editar | editar còdic]- ↑ 1,0 1,1 Nature Biotechnology.32(12)
- 1262–7.doi:10.1038/nbt.3026.
- ↑ Nature Methods.12(9)
- 823–6.doi:10.1038/nmeth.3473.
- ↑ Journal of Biotechnology.241
- 136–146.ISSN 0168-1656.doi:10.1016/j.jbiotec.2016.11.011.
- ↑ Nucleic Acids Research.44(W1)
- W267-71.doi:10.1093/nar/gkw407.
- ↑ Bioinformatics.30(10)
- 1473–5.doi:10.1093/bioinformatics/btu048.
- ↑ Scientific Reports.6
- 35766.doi:10.1038/srep35766.
- ↑ Biotechnology and Bioengineering.111(8)
- 1604–1616.doi:10.1002/bit.25233.
- ↑ (2015).PLOS ONE.10(4)
- i0124633.doi:10.1371/journal.posa.0124633.
- ↑ Nucleic Acids Research.42(Web Server issue)
- W401-7.doi:10.1093/nar/gku410.
- ↑ Nucleic Acids Research.44(W1)
- W272–6.doi:10.1093/nar/gkw398.
- ↑ Genome Biology.17(1)
- 148.doi:10.1186/s13059-016-1012-2.
- ↑ Nature Biotechnology.31(9)
- 827–32.doi:10.1038/nbt.2647.
- ↑ Bioinformatics.31(7)
- 1120–3.doi:10.1093/bioinformatics/btu743.
- ↑ Nature Methods.12(10)
- 982–8.doi:10.1038/nmeth.3543.
- ↑ (2014).PLOS ONE.9(9)
- i108424.doi:10.1371/journal.posa.0108424.
- ↑ «[1]».
- ↑ Nature Biotechnology.35(4)
- 347–349.doi:10.1038/nbt.3804.
- ↑ Bioinformatics.30(18)
- 2673–5.doi:10.1093/bioinformatics/btu354.
- ↑ Biology Direct.10(1)
- 4.doi:10.1186/s13062-015-0035-z.
- ↑ The CRISPR Journal.1(2)
- 182–190.doi:10.1089/crispr.2017.0021.
- ↑ BMC Biotechnology.19(1)
- 40.doi:10.1186/s12896-019-0535-5.
- Este artícul conté una traducció derivada de «Herramientas de diseño de CRISPR-Cas» de Wikipedia en castellà publicada baix la Llicència de documentació lliure de GNU i la Llicència Creative Commons Reconeiximent-CompartirIgual 4.0 Internacional.