Termociclador

Termociclador.

Un termociclador, també conegut com a màquina de PCR o reciclador tèrmic de PCR és un aparat usat en biologia molecular que permet realisar els cicles de temperatures necessaris per a una reacció en cadena de la polimerasa d'amplificament d'ADN o per a reaccions de seqüència en el método de Sanger. El model més comú consistix en un bloc de resistència elèctrica que distribuïx a través d'una placa una temperatura homogénea durant temps que poden ser programables, normalment en rancs de temperatura de 4 °C a 96 °C. Ya que les reaccions incubadas en l'aparat són en solucions acuosas, solen incloure una placa de tapa calfada constantment a 103 °C per a evitar la condensació d'aigua en les tapes dels tubos a on ocorre la reacció, i aixina evitar que els soluts es concentren, lo que modificaria les condicions òptimes per a l'enzima polimerisant i la termodinàmica del apareament dels iniciadores. També existixen atres tecnologies menys populars utilisant distribució d'aire calent en tubos suspesos, conseguint el mateix objectiu de transferir calor eficientemente a la reacció per a que canvien els cicles de temperatures. Llavors, en el termociclador es programen cicles ràpits i continus per a iniciar els processos de separació i desnaturalización de les cadenes de ADN mòle a altes temperatures, després a baixes temperatures el anillamiento i els iniciadores per a que després actue la polimerasa Taq incorporant els dNTPs d'acort a el ADN mòle durant el procés de PCR.

Sense dubte, el termociclador ha segut una gran ferramenta, la qual ha ajudat enormement a la comunitat científica al moment de realisar experiments a través de la tècnica de reacció en cadena polimerasa, la qual encara que posseïx solament tres passos per a ser realisada, comporta canvis de temperatura que deuen ser molt precisos ya que qualsevol error de càlcul pot resultar en un experiment fallanc. Per estes implicancias, va ser necessari idear una tecnologia dura en la qual es poguera obtindre una reacció en cadena polimerasa en el menor inconvenient possible, a on solament s'introduïren els reactius i la reacció es desenrollara sense cap intervenció manual, d'esta necessitat es va conseguir desenrollar el termociclador, el qual s'encarrega de transformar energia (energia elèctrica a energia tèrmica per a canviar la temperatura, depenent de l'etapa a la qual es trobe l'experiment), intercanviar informació (ya que el software s'encarrega de rebre i donar informació sobre l'experiment) i controlar tant la matèria com l'energia en la qual es realisa l'experiment, per això el termociclador treballa en els tres tipos d'operant en lo que a tecnologia es referix (matèria, energia i informació).

Tipos de termocicladores

Termociclador estàndar.

Des dels seus inicis, esta tecnologia s'ha anat desenrollant per a adaptar-se a les distintes necessitats, per eixemple existixen termocicladores en els quals els cicles no produïxen evaporament de la mescla (utilisant gotes d'oli mineral), uns atres que permeten realisar varis programes al mateix temps i uns atres que permeten treballar a temperatures diferents, i molts uns atres més. Pero en lo que a model estàndar es referix, trobarem com a característiques un teclat i pantalles les quals nos indiquen la temperatura, els cicles i el temps.

Des de fa alguns anys vàries companyies que fabriquen i comercialisen estos aparats han canviat la resistència elèctrica per la tecnologia Peltier aprofitant les propietats dels semiconductors. Este material oferix millor uniformitat en la temperatura i rampes d'increment i decremento de la temperatura molt més pronunciades, obtenint millors resultats en els processos de el PCR. En la busca de millorar la precisió, exactitut i homogeneïtat de la temperatura també s'han introduït metals com l'or, l'argent i unes atres aleacions en els blocs dels pous, conseguint estabilitat i reproducibilidad en els ensajos. Els actuals termocicladores són capaços de realisar ràpits canvis de temperatura, i d'esta forma realisar els passos de desnaturalización de el ADN, alineamiento o unió del cebador en la seqüència de ADN complementària i extensió de la cadena de ADN de forma cíclica. En atres paraules, la tecnologia del termociclador ha aplegat a ser molt versàtil sobre les distintes necessitats dels experiments que van sorgint en el temps.

Precaucions d'us

Molts instruments en els laboratoris poden provocar certs accidents, i el termociclador no és l'excepció:

• El calfar les mostres pot provocar explosions per la diferència de velocitat de calfament produïx bombetes que poden esclatar.
• Si no es té afluixat el tapó de les botelles o matraces és possible que estos esclaten.
• Es deu utilisar la roba i pantalla facial adequades, i controlar l'intensitat de l'aparat, que solament pot ser la màxima en aigua i la mínima si s'utilisa gel d'agarosa.
• Deurà existir una taula que mostre els temps en cada posició del potenciometro i de les cantitats a amprar.