Barnasa

Barnasa (Un portmanteau de "BActerial" "RiboNucleASA") és una proteïna bacteriana que consta de 110 aminoàcits i té activitat de ribonucleasa. És sintetisada i secretada per la bactèria Bacillus amyloliquefaciens, pero és letal a la cèlula quàn és expressada sense el seu inhibidor barstar. L'inhibidor s'unix al lloc actiu de la ribonucleasa i lo ocluye, impedint que la barnasa danye el ARN de la cèlula en acabant de que s'haja sintetisat pero ans que s'hi haja secretado. El complex barnasa/barstar es caracterisa per la seua extraordinària unió proteïna-proteïna, en una taxa d'of 10⁸s⁻¹M⁻¹.

Estudis de plegat de proteïnes

La barnasa no té enllaços disulfuro, ni requerix cationes divalentes o components no péptidicos per a plegar-se. Esta simplicitat, en combinació en la seua transició de plegament reversible, significa que la barnasa ha segut àmpliament estudiada per a entendre cóm es pleguen les proteïnes. El plegament de la barnasa ha segut àmpliament estudiat en el laboratori d'Alan Fersht, qui ho va utilisar com a cas de prova per a desenrollar un método de caracterisació dels estats de transició de plegament de les proteïnes conegut com anàlisis de valor phi.

Lloc actiu i mecanisme catalític

La barnasa cataliza la hidrólisis en els llocs de GpN dels diribonucleótidos. La divisió ocorre en dos passos utilisant un mecanisme general àcit-base: durant el primer pas de transesterificación es forma un intermediari cíclico, que després es hidroliza per a lliberar el ARN dividit. Els dos residus més importants que intervenen en la catálisis són el Glu73 i el His102, abdós essencials per a l'activitat enzimàtica. El Glu73 és la base general mentres que el His102 és l'àcit general. Encara que no està directament involucrat en la catálisis àcit-base, el Lys27 també és crític per a l'activitat; ha segut implicat en l'unió del substrat en estat de transició.