Transferència nuclear celular

La transferència nuclear celular és una part del procés de clonació. Consistix en introduir el material genètic de la cèlula a clonar en un ovòcit de la mateixa espècie prèviament enucleado sense el seu propi material genètic. Es considera que l'ovòcit té la capacitat de reprogramar el programa d'expressió gènica celular, reiniciant-ho d'alguna manera, de manera que la cèlula nova resultant serà capaç de donar lloc a qualsevol atre tipo celular.

Etapes de la transferència nuclear celular

Conceptualment, la transferència nuclear consta de tres fases:

• Enucleación de l'ovòcit: en primer lloc deu eliminar-se el material genètic de l'ovòcit receptor. Pot realisar-se per mig de micro manipulació o per métodos químics.

• Transferència del núcleu: generalment es realisa per mig de fusió del cariosoma (núcleu celular envolt per una chicoteta porció de citoplasma) en la citoplasma del ovoito, per electrofusión o en algun fusogénico (virus Sendai). Com a alternativa es pot realisar per microinyección, com si es tractara d'un procediment d'injecció intracitoplásmatica d'esperma.

• Activació de l'ovòcit: lloc que, a diferència de l'espermatozoide, les cèlules embrionàries o adultes no són capaces d'activar l'ovòcit, deu induir-se l'activació una volta realisada la transferencrograme el genoma introduït i escomence el programa de desenroll embrionari o algun estímul químic (etanol o estronci), o ben combinant abdós.

Experiments realisats de transferència nuclear celular

Experiments en amfibis Granota pipiens i Xenopus laevis, en estos experiments es va conseguir transferir núcleus en l'estadi de blàstula a ous desnucleados. Es varen utilisar estos animals degut a que els oòcits de Granota pipiens i Xenopus laevis medixen d'1 a 2 mm i a que la embriogénesis ocorre fòra del cos matern.

John Gurdon va transferir núcleus de cèlules epiteliales de l'intestí de taperot a ous de sapo.

Ian Wilmut i colaboradors en 1997 varen clonar a l'ovella Dolly a partir d'un núcleu totalment diferenciat de la ubre d'una ovella adulta. L'eficiència de l'experiment va ser baixa i solament va aplegar a terme en l'ovella Dolly.

En 1998 Cibelly et al varen obtindre tres vedells idèntics a partir de fibroblastos d'un feto en 55 dies i en eixe mateix any Wakayama et al varen clonar decenes de rates a partir de cèlules somàtiques. L'eficiència tan baixa d'estos experiments pot deure's a que els animals clonats siguen més dèbils.

Es varen transferir núcleus de cèlules fetals d'ovella que havien segut transfectadas en el gen humà cDNA del factor IX situat a continuació del promotor específic de la glàndula mamària d'ovella a cèlules d'ovari anucleadas. Estes cèlules varen ser implantades en mares adoptives i la seua descendència, dos ovelles transgèniques, Polly i Molly, produïxen grans cantitats del factor IX humà de coagulació sanguínea en la seua llet.

Experiments de transferència del núcleu d'una ovella a un òvul de vaca.