Prova del indol

La prova del indol és una prova bioquímica realisada en espècies bactèrianas per a determinar l'habilitat del organisme de lliberar indol del aminoàcit triptófano. Esta divisió molecular és conseguida per una série d'enzimas intracelulars diferents, un sistema que en conjunt se li crida en freqüència triptofanasa.

Es genera el indol per una desaminación reductiva del triptófano via la molècula intermediària àcit indolpirúvico. Les triptofanasas catalizan la reacció de desaminación, durant el qual es remou el grup amino (NH₂) de la molècula de triptófano. Els productes finals de la reacció són el indol, àcit pirúvico, amoníac (NH₃) i energia. Com coenzima de la reacció es requerix al fosfat de piridoxal.

Procediment

Tal com ocorre en moltes proves bioquímiques, els resultats d'una prova de indol s'indiquen en el canvi de color que seguix a la reacció. El cultiu bacterià pur deu ser sembrat en un caldo en triptofano o peptona estèrils o abdós per 24 a 48 hores abans de realisar la prova. Després de l'incubació, s'afigen cinc gotes de reactiu de Kovacs per a indol (alcohol isoamílico, p-dimetilaminobenzaldehído i àcit clorhídric concentrat) al caldo del cultiu.

Una variant de la prova es realisa usant el reactiu de Ehrlich (usant alcohol etílico en lloc de l'alcohol isoamilo, desenrollat per Paul Ehrlich), en especial si es té un organisme que no siga fermentador i en organisme anaeròbic.

Este reactiu du el mateix nom que el reactiu per a la prova de oxidasa, encara que no deu confondre's, ya que la seua formulació química és totalment diferent, per això es diferencien fent menció a la prova per a la que són utilisats, com a reactiu de Kovacs per a oxidasa (diclorhidrato de tetrametil-p-fenilendiamina) i reactiu de Kovacs per a indol (alcohol isoamílico, p-dimetilaminobenzaldehído i HCl concentrat).

Els resultats positius originen anells de Liesegang d'un color roig o roig-violeta en la superfície de la capa d'alcohol en el cultiu. Un resultat negatiu es mostra groc. Un resultat variable pot ocórrer quan es mostra un color anaranjado. Això és per la presència d'escatol, també conegut com metil-indol o indol metilado, un atre possible producte de la degradació del triptófano.

Bactèries indol positives

Resultat positiu per a prova de Indol

Les bactèries que resulten indol positives en trencar el indol del triptófano, inclouen:

• Aeromonas hydrophila, Aeromonas punctata,
• Bacillus alvei,
• La majoria dels Citrobacter spp.,
• Edwardsiella spp.,
• Escherichia coli,
• Flavobacterium spp.,
• Haemophilus influenzae,
• La majoria dels Proteus spp. (llevat P. mirabilis),
• Klebsiella oxytoca
• Plesiomonas shigelloides,
• Pasteurella multocida, Pasteurella pneumotropica, i
• Vibrio spp.
• Staphylococcus aureus